Химия онлайн
Получение рекомбинантных ДНК и их амплификация. «Биохимия-Л»

автор: Лелевич Владимир

Биологическая химия


Получение рекомбинантных ДНК и их амплификация.

При получении рекомбинантных ДНК выделяют эти молекулы из двух разных источников. Каждую из них в отдельности фрагментируют, используя одну и ту же рестриктазу. После процедуры нагревания и медленного охлаждения смеси полученных фрагментов, наряду с исходными молекулами ДНК образуются и рекомбинантные, состоящие из участков ДНК, первоначально принадлежавших разным образцам. Используя технику рекомбинантных ДНК, удаётся исследовать варианты генов, ответственных за развитие многих заболеваний. Этим способом могут быть идентифицированы различные мутации.

Для получения значительных количеств рекомбинантного генетического материала проводят клонирование ДНК, предполагающее встраивание нужного фрагмента ДНК в векторную молекулу, Вектор обеспечивает проникновение этой рекомбинантной ДНК в бактериальные клетки. При размножении трансформированных бактерий происходит увеличение числа копий введенного фрагмента ДНК, а также синтез не свойственных бактериальной клетке, но весьма ценных для человека белковых продуктов. Таким способом получают вакцины, инсулин, гормон роста, факторы свертывания крови и др.

Работа с нуклеотидными последовательностями требует наличия достаточного количества материала для исследования. Поэтому фрагменты ДНК предварительно амплифицируют (увеличивают количество). Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), предложенный в 1983 г. Карри Муллисом, позволяет подвергать специфической амплификации в условиях in vitro любые образцы ДНК.


Полимеразная цепная реакция протекает в три стадии:

1. Денатурация. Инкубационную смесь, в которой содержится образец нужной ДНК, нагревают до температуры 90°С. При этом в течение 15 секунд происходит разрушение слабых водородных связей между нитями ДНК, и из одной двухцепочечной молекулы образуется две одноцепочечные.  

2. Гибридизация праймеров. Температуру снижают до 50°С. При этом происходит гибридизация цепей ДНК с праймерами. Эта стадия обычно протекает 30 секунд. 

3. Полимеризация. Инкубационную смесь нагревают до 70°С. При такой температуре полимераза удлиняет оба праймера с их 3'-концов. Праймеры дорастают до размеров матрицы. Этот процесс протекает в течение 90 секунд. В результате количество ДНК удваивается.


Процедуру проводят в автоматическом режиме в приборе – термоциклере (циклизаторе, амплификаторе). Это устройство позволяет задавать нужное количество циклов и выбирать оптимальные временные и температурные параметры. С помощью ПЦР можно получить достаточное количество копий участков ДНК, в которых предполагаются присутствие мутаций, полиморфизм сайтов, можно проводить ДНК-диагностику инфицированности пациентов вирусными, бактериальными и грибковыми возбудителями болезней.


просмотров: 65
Search Results from Ebay.US* DE* FR* UK
DE-OX-ID / DEOXID Premium Electronic Contact Cleaner Spray, The Best!

$6.45
End Date: Sunday Oct-15-2017 2:22:15 PDT
Buy It Now for only: $6.45
|
WD-40 490050 Multi-Use Lubricant Smart Straw Spray 12 OZ (Pack of 1) - NEW

$28.95
End Date: Monday Sep-25-2017 10:47:16 PDT
Buy It Now for only: $28.95
|
Starbrite Aluminum Cleaner Restorer 64 fl oz 87764 Pontoon Boat Canoe Cleaning

$57.99
End Date: Monday Oct-2-2017 14:07:02 PDT
Buy It Now for only: $57.99
|
Buy 3 get 1 FREE VANI-SOL - PRO HIGH ACID TOILET BOWL CLEANER (4) 32 oz Bottles

$8.88
End Date: Tuesday Sep-26-2017 13:46:51 PDT
Buy It Now for only: $8.88
|
WD-40 300083 Specialist Electrical Contact Cleaner Spray 11 OZ (Pack of 1)

$6.07
End Date: Sunday Oct-1-2017 18:11:14 PDT
Buy It Now for only: $6.07
|
WD-40 490088 Lubricant,Aerosol Can,16 oz. G5417641

$3.15
End Date: Friday Oct-6-2017 5:40:34 PDT
Buy It Now for only: $3.15
|
16 pack - HOMAX brand (1 Bag) (16 Pads) #0000 (0000) SUPER FINE Steel Wool

$5.59
End Date: Wednesday Sep-27-2017 14:44:47 PDT
Buy It Now for only: $5.59
|
Premium Electronic Contact Cleaner Spray The Best Quick Drying Specialist 11 Oz

$12.00
End Date: Sunday Oct-15-2017 19:18:18 PDT
Buy It Now for only: $12.00
|
Search Results from AllSoft: новости

Сан-Франциско ждет! Вы — Маркус, блестящий хакер, объединяетесь с DedSec, чтобы противостоять ctOS 2.0, системе глобального контроля. Сокрушите ее, это будет взлом века!
Первым покупателям — скидка 250 рублей! Успей купить первым! 


подробнее»
181528

PrintStore Pro — программа для учета расходных материалов и оборудования. Просчитывает запас каждого картриджа в каждом принтере и помогает сформировать заказ на следующий период. Поддерживает учет перезаправок. Учитывает при всех операциях совместимость принтеров и картриджей. Хранит историю всех действий с картриджами и принтерами, позволяет создавать множество отчетов.


подробнее»
123795

Fax Voip T38 Fax & Voice — факс и автоответчик для вашей SIP/H.323/ISDN сети. Виртуальные голосовые факс модемы. Поддержка T.38, Fax поверх G.711 и CAPI факс. Одновременные SIP регистрации, маршрутизация вызовов, цветные факсы. Совместимость со стандартными факс программами. Fax Voip принтер, Консоль Fax Voip для управления факсами. Сохранение входящих факсов в TIFF/PDF/SFF файлы. Маршрутизация входящих факсов: E-mail, Сохранить в папке, Печать. Факс по запросу. Отправка факса через e-mail (Почта-на-факс) и получение факсов на e-mail (Факс-на-почту).


подробнее»
139103

Fax Voip T38 Fax & Voice — факс и автоответчик для вашей SIP/H.323/ISDN сети. Виртуальные голосовые факс модемы. Поддержка T.38, Fax поверх G.711 и CAPI факс. Одновременные SIP регистрации, маршрутизация вызовов, цветные факсы. Совместимость со стандартными факс программами. Fax Voip принтер, Консоль Fax Voip для управления факсами. Сохранение входящих факсов в TIFF/PDF/SFF файлы. Маршрутизация входящих факсов: E-mail, Сохранить в папке, Печать. Факс по запросу. Отправка факса через e-mail (Почта-на-факс) и получение факсов на e-mail (Факс-на-почту).


подробнее»
141754

Retouch Pilot — программа для удаления изъянов с фотографий, таких как царапины, мелкие пятна и другие мелкие дефекты, существующие на фото или полученные при сканировании. Вы можете удалять целые объекты, попавшие случайно в кадр, а также инструментом пластика изменять форму и пропорции. Программа позволяет ретушировать изъяны кожи - пятнышки, морщинки и др..


подробнее»
26516

R-Studio — эффективное программное обеспечение, позволяющее восстанавливать данные с жестких дисков, CD, DVD, дискет, USB дисков, ZIP дисков и устройств флеш-памяти.


подробнее»
88115

Сборка электронных каталогов автозапчастей включает в себя грузовые автомобили Европы и Китая. В сборку включена программа Tecdoc, позволяющая подобрать не оригинальные запчасти.


подробнее»
183206

Sound Pilot озвучивает клавиатуру. Каждое прикосновение к клавиатуре рождает звук, который разнообразит процесс набора текста, развлекает и снижает утомляемость.


подробнее»
78205
Search Results from «Озон» Химия
 
В. Ф. Травень Органическая химия. Учебное пособие. В 3 томах. Том 1
Органическая химия. Учебное пособие. В 3 томах. Том 1
Первое издание учебника "Органическая химия", изданного в 2004 году, получило заслуженное признание среди студентов и преподавателей. Вместе с тем, переход на двухуровневую систему высшего образования предъявляет новые требования к содержанию учебников, что явилось причиной существенной переработки книги. В настоящем, пятом, издании учебный материал систематизирован с учетом степени глубины изучения предмета: для начального освоения дисциплины в основных разделах излагаются фундаментальные сведения, а специализирующимся в области органической химии и продолжающим обучение после получения степени бакалавра адресованы разделы "Для углубленного изучения". Пятое издание учебника подготовлено в комплекте с задачником (В.Ф.Травень, А.Ю.Сухорукое, Н.А.Кондратова "Задачи по органической химии и практикумом (В.Ф.Травень, А.Е.Щекотихин "Практикум по органической химии . Данный набор учебных изданий обеспечивает двухуровневое изложение учебного материала и не имеет аналогов.

Для студентов, аспирантов и преподавателей химических факультетов университетов и химико-технологических вузов....

Цена:
474 руб

И. Бертини, Г. Грэй, Э. Стифель, Дж. Валентине Биологическая неорганическая химия. Структура и реакционная способность (комплект из 2 книг) Biological Inorganic Chemistry: Structure and Reactivity
Биологическая неорганическая химия. Структура и реакционная способность (комплект из 2 книг)
В учебном издании, написанном ведущими зарубежными учеными, изложены фундаментальные теоретические представления, лежащие в основе функционирования природных биологических систем, содержащих ионы металлов, а также прикладные проблемы в этой области. Бионеорганическая химия занимает междисциплинарную нишу на стыке координационной, неорганической, металлоорганической и медицинской химии, фармакологии и химии окружающей среды. В научном сообществе эта книга признана наиболее полным и фундаментальным на сегодняшний день трудом в этой области.
В русском переводе выходит в двух томах.

Для студентов старших курсов и аспирантов, а также научных...

Цена:
1829 руб

Химия. Учебник для вузов
Химия. Учебник для вузов
Авторы, лауреаты конкурса Госкомвуза России по созданию учебников нового поколения, обобщили огромный опыт преподавательской работы в СПбГУ, СПбГТУ, а также за рубежом. Первая часть учебника включает теоретические основы общей химии на самом современном уровне, вторая часть посвящена химии элементов, которая дается в компактном виде благодаря обобщению по классам бинарных соединений.

Предназначен студентам технических и химико-технологических специальностей, будет полезен преподавателям вузов и учителям школ, а также профессионалам-химикам для обновления и приведения в систему фундаментальных знаний по общей и неорганической химии....

Цена:
419 руб

Э. Илиел Основы стереохимии Elements of stereochemistry
Основы стереохимии
Учебное издание написано одним из крупнейших ученых в области стереохимии органических соединений, являющейся краеугольным камнем современной органической химии. Основы стереохимии изложены в форме, доступной для читателей, которые только начинают изучение органической химии. Глава, посвященная стереохимии неорганических соединений, написана специалистом в области комплексных соединений Ф.Басоло.

Для студентов химических и других вузов....

Цена:
216 руб

В. В. Еремин, А. Я. Борщевский Основы общей и физической химии
Основы общей и физической химии
Книга создается на основе годичного курса "Общая и физическая химия" для студентов 2-го курса физического факультета МГУ. Выбирая уровень изложения, мы исходили из того, что читать ее будут люди естественно-научного склада, имеющие полное или неполное высшее физико-математическое образование, но имеющие о химии отдаленное представление или не имеющие вообще никакого представления.
Основные задачи книги:
1. Доказать физикам необходимость и плодотворность химического подхода к изучению мира. Показать области применения химии в физике.
2. Сформировать у физиков представление о языке и законах химии, химическом способе мышления и познания окружающего мира.
3. Продемонстрировать применение физических теорий к химическим процессам.
4. Объяснить, почему и как протекают химические реакции.

Тот взгляд на химию, который мы хотим донести до читателя, состоит в следующем. Химия - одна из наук, изучающих природу. Все многообразие проблем, которые решает химия, можно свести к следующим основным вопросам:
  • Какие бывают вещества?
  • Как они устроены?
  • Как связано строение веществ с их свойствами?
  • Как из одних веществ получить другие, более полезные или интересные?

  • Химия как наука и как способ познания природы обладает необычными свойствами. У нее нет собственных законов. Все законы химии, включая Периодический закон, служат лишь частными проявлениями общих законов, которыми занимается физика. Поэтому недалекие научные работники считают химию частью физики. Разумеется, это глубоко ошибочная точка зрения. А что же есть в химии своего? В первую очередь, колоссальное многообразие изучаемых объектов. Одних только чистых индивидуальных веществ в химии охарактеризовано около 20 миллионов, не считая многочисленных смесей. А ведь есть еще и химические реакции между веществами. Из всех известных химии веществ лишь очень небольшая доля - всего несколько процентов - имеется в природе, остальные вещества - продукт деятельности человека. По мнению выдающего американского химика Роальда Хоффмана, химики отличаются от любых других ученых тем, что собственноручно творят те объекты, которые потом воспринимают и изучают. В точности то же самое делают писатели, художники и композиторы. Это роднит химию с искусством. Другие естественные науки - физика и биология - изучают то, что создано природой, а химия - главным образом то, что сделала сама.

    Для студентов и преподавателей физических и химических факультетов....

    Цена:
    1929 руб

    Н. Л. Глинка Общая химия. Учебное пособие
    Общая химия. Учебное пособие
    Учебное пособие предназначено для студентов нехимических специальностей высших учебных заведений.
    Может служить пособием для лиц, самостоятельно изучающих основы химии, для учащихся химических средних профессиональных образовательных учреждений и старших классов средних школ....

    Цена:
    990 руб

    Н. Д. Свердлова Общая и неорганическая химия. Экспериментальные задачи и упражнения
    Общая и неорганическая химия. Экспериментальные задачи и упражнения
    Пособие предназначено для проведения практических семинарских занятий и самостоятельной работы студентов, обучающихся по направлениям естественнонаучного образования по профилям "химия", "биология и химия", "биоэкология". Содержание практикума охватывает химию s-, р- и d-элементов и представлено в виде отдельных заданий, усложняющихся по мере углубления освоения теоретических основ курса.
    Перед каждой работой дано небольшое теоретическое введение и приведены примеры решения расчетных задач. Это позволит студентам самостоятельно найти ответы на поставленные вопросы, сделать обобщающие выводы и, тем самым, лучше осмыслить суть проведенных экспериментов.
    Пособие создано с целью реализации развивающего личностно-ориентированного подхода к обучению студентов. Оно построено так, чтобы максимально обеспечить самостоятельность познавательной работы студентов и развитие их мыслительных способностей....

    Цена:
    579 руб

     Практикум и индивидуальные задания по векторной алгебре и аналитической геометрии (типовые расчеты). Учебное пособие
    Практикум и индивидуальные задания по векторной алгебре и аналитической геометрии (типовые расчеты). Учебное пособие
    Настоящий практикум представляет собой сборник индивидуальных заданий (типовых расчетов) из курса высшей математики по темам "Векторная алгебра" и "Аналитическая геометрия". Излагаемые основные понятия сопровождаются большим количеством примеров с подробными решениями. Первая глава практикума содержит индивидуальные задания по теме "Скалярное, векторное и смешанное произведения". Вторая глава посвящена аналитической геометрии на плоскости и содержит индивидуальные задания по следующим темам: полярная система координат, прямая на плоскости, кривые второго порядка. Третья глава содержит необходимый материал по аналитической геометрии в пространстве: плоскость в пространстве, прямая в пространстве, прямая и плоскость в пространстве, поверхности второго порядка. Каждый типовой расчет включает в себя несколько заданий. Всего практикум содержит восемь типовых расчетов по 30 вариантов каждый.

    Предназначено для студентов и преподавателей технических, экономических, аграрных и других вузов. Практикум также может быть использован учителями для проведения дополнительных занятий со школьниками....

    Цена:
    929 руб

    П. П. Кукин, В. В. Юшин, С. Г. Емельянов Теория горения и взрыва
    Теория горения и взрыва
    В предлагаемом авторским коллективом преподавателей Юго-Западного государственного университета, Российского государственного технологического университета им. К.Э.Циолковского и Марийского государственного технического университета учебном пособии изложен материал, который используется при чтении курса дисциплин: "Теория горения и взрыва", "Безопасность жизнедеятельности", "Безопасность в чрезвычайных ситуациях" в части развития, прогнозирования и ликвидации последствий техногенных взрывов и пожаров.
    Соответствует Федеральному государственному образовательному стандарту высшего профессионального образования третьего поколения.

    Данное пособие предназначено для студентов направления "Техносферная безопасность", а также других направлений и специальностей высшего профессионального образования для углубленного изучения и проработки лекционного материала, выполнения практических и лабораторных работ по расчету и прогнозированию опасных поражающих факторов при горении и взрыве....

    Цена:
    889 руб

    И. М. Колесников, И. А. Семиохин, В. А. Винокуров, С. И. Колесников Сборник задач по термодинамике физико-химических процессов. Учебное пособие. В 2 томах. Том 2
    Сборник задач по термодинамике физико-химических процессов. Учебное пособие. В 2 томах. Том 2
    Во втором томе учебного пособия представлены решения задач по термодинамике физико-химических процессов, которые приведены в томе первом. Решения задач проведено на основе законов и уравнений, применяемых в физической химии и химической термодинамике,...

    Цена:
    2112 руб



    2007 Copyright © GenDNA.ru Мобильная Версия v.2015 | PeterLife и компания
    Пользовательское соглашение использование материалов сайта разрешено с активной ссылкой на сайт
    Яндекс.Метрика Яндекс цитирования